血球計算盤/血球計數器 Hemocytometer

Thoma、Bürker-Türk、Fuchs-Rosenthal 等格線血球計算盤,亮線與暗線款,專用蓋玻片與計算盤組

血球計數器(Hemocytometer,又稱血球計算盤、血球計數板、計算盤)是一片刻有精密格線的厚玻璃板,格線區比兩側低一個固定深度,蓋上專用蓋玻片後,在顯微鏡下數格子裡的細胞,就能換算出每毫升的細胞數,用於血球、培養細胞與酵母等計數。本分類也包含計算盤專用蓋玻片。主要品牌是 Erma。挑選重點見下方選購指南,常見問題見頁尾問答。

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共 7 筆血球計算盤/血球計數器
第 1~7 筆
科研小知識

認識血球計算盤/血球計數器、怎麼選、怎麼用

什麼是血球計數器

構造、格線與換算原理

血球計數器的中央有兩個計數區,表面刻著邊長固定的方格;計數區比兩側支撐面低一個精確的深度(多數型號 0.1 mm,Fuchs-Rosenthal 型 0.2 mm)。蓋上專用蓋玻片後,每個方格上方就是一個已知體積的小空間。

例如 1 mm × 1 mm 的方格、深 0.1 mm,體積是 0.1 mm³,也就是 0.1 µL。數出這個方格裡的細胞數,乘以 10⁴,就是每毫升的細胞數;樣品有稀釋時再乘上稀釋倍數。

玻璃計算盤洗淨後可以重複使用。要用完即丟、免清洗,或想改用儀器自動計數,請看細胞計數器。

血球計數器選購指南

依要數的樣品選格線型式

你的樣品常用格線型式說明
培養細胞、血球、酵母等一般計數改良型 Neubauer(Improved Neubauer)最常用,深度 0.1 mm,大小格適合不同濃度
依實驗室或教科書慣例Bürker-Türk深度 0.1 mm,用法與 Neubauer 類似
血球稀釋後計數Thoma深度 0.1 mm,計數區 1 mm × 1 mm
濃度很低的樣品,例如腦脊髓液Fuchs-Rosenthal深度 0.2 mm、計數面積大,一次數到的細胞比較多
三條規則
  1. 照實驗方法指定的型式買。不同格線的換算公式不同,沿用實驗室既有的方法與計算方式,數據才能和過去比較。
  2. 亮線或暗線看顯微鏡。亮線(Bright-Line)的計數區表面經鍍膜處理,格線對比清楚、容易辨認;暗線(Dark-Line)的格線呈暗色。依你的顯微鏡與觀察習慣選,細節以商品說明為準。
  3. 蓋玻片要用計算盤專用的。一般蓋玻片太薄,容易被液體表面張力拉彎,計數區深度就不準。專用蓋玻片較厚、表面平整,例如 MARIENFELD 血球計算盤用蓋玻片厚 0.4 mm。

血球計數器的類型

依格線型式與包裝

血球計數器的使用步驟

以培養細胞計數為例

  1. 清潔與蓋片:計算盤與蓋玻片用純水或 70% 酒精擦乾淨、晾乾,把蓋玻片蓋在計數區上方的支撐面。
  2. 混勻樣品:細胞懸浮液輕輕吹打均勻;要算存活率時,與台盼藍(Trypan Blue)等量混合,稀釋倍數就是 2。
  3. 加樣:用微量吸管吸約 10 µL,貼在蓋玻片邊緣慢慢放出,讓液體靠毛細作用自己流進計數區。不要溢出到溝槽,也不要有氣泡。
  4. 計數:在顯微鏡下數指定方格裡的細胞。壓在格線上的細胞,只數上邊與左邊(或依實驗室慣例固定兩邊),避免重複計算。
  5. 換算:細胞數 ÷(計數面積 mm² × 深度 mm)× 1000 × 稀釋倍數,就是每毫升的細胞數。

血球計數器使用與注意

清潔、保存與計數誤差

用完馬上清洗

樣品乾掉後細胞與蛋白質會黏在格線上,用純水沖洗後以拭鏡紙或軟布吸乾,不要用刷子或研磨性清潔劑刮計數區。

生物樣品先消毒

計數血液或可能有感染性的樣品,用完先依實驗室規定消毒,再清洗。

小心刮傷

計數區表面與格線刮傷後會影響判讀與蓋玻片貼合,用完放回收納盒保存,不要和其他玻片混放。

數夠數量

每次計數的細胞太少,誤差會變大。濃度太高就先稀釋,太低就多數幾個方格或改用計數面積大的型式。

FAQ

血球計數器常見問答

格線型式、亮線暗線、蓋玻片與換算

還有問題?聯絡客服 →
Q

血球計數器、血球計算盤、細胞計數板是同一種東西嗎?

是,都是指刻有格線、用顯微鏡數細胞的計數盤(Hemocytometer),名稱依習慣不同。自動細胞計數儀與用完即丟的一次性計數板,見細胞計數器。
Q

改良型 Neubauer、Thoma、Bürker-Türk、Fuchs-Rosenthal 差在哪?

差在格線的劃分方式和計數區深度,換算公式也跟著不同。前三種深度多為 0.1 mm,Fuchs-Rosenthal 是 0.2 mm、適合低濃度樣品。改良型 Neubauer 可參考 Erma 改良紐鮑爾細胞計數板。
Q

亮線(Bright-Line)和暗線(Dark-Line)怎麼選?

依顯微鏡與觀察習慣選,兩者計數方式相同。亮線款的計數區表面經鍍膜處理,格線對比清楚、容易辨認;暗線款的格線呈暗色。鍍膜與刻線方式依型號,以商品說明為準。
Q

可以用一般蓋玻片代替嗎?

不建議。一般蓋玻片薄,容易被液體拉彎,計數區深度改變就會算錯。請用計算盤專用的厚蓋玻片,例如 MARIENFELD 血球計算盤用蓋玻片。
Q

細胞濃度怎麼算?

細胞數 ÷(計數面積 mm² × 深度 mm)× 1000 × 稀釋倍數=每毫升細胞數。以深度 0.1 mm、數 1 mm² 的大方格為例,平均每格的細胞數 × 10⁴ × 稀釋倍數。
Q

台盼藍是做什麼用的?

用來分辨死細胞與活細胞。台盼藍(Trypan Blue)進不了細胞膜完整的活細胞,死細胞會被染成藍色;未染色細胞數 ÷ 總細胞數就是存活率。

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